一、产品概述
由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的纯化正常兔lgG(5mg/ml)(货号:P120-101)为从正常兔血清中分离纯化的总免疫球蛋白G(IgG),经离子交换层析纯化,未偶联任何标签或标记物。正常兔IgG广泛用作免疫检测实验中的阳性对照、同型对照或封闭试剂,用于评估非特异性背景或验证实验体系的有效性。本产品浓度为5 mg/ml,缓冲液为含叠氮化钠的磷酸盐缓冲液(PBS),可在2–8°C稳定保存2年。
二、关键规格
参数 | 详细信息
物种 | 兔
表位标签 | 无
同型 | IgG
偶联物 | 未偶联
纯度 | 纯化(非亲和纯化,采用分级分离+DEAE层析)
浓度 | 5 mg/ml
保存条件 | 2 – 8 °C
有效期 | 收货后2年
缓冲液 | 磷酸盐缓冲液(PBS),含0.09%叠氮化钠
三、产品形式与组成
本品以液体形式提供,溶于磷酸盐缓冲液(PBS),pH 7.2–7.4,并加入0.09%叠氮化钠作为防腐剂。总蛋白浓度为5 mg/ml(基于IgG在280 nm处吸光系数A280 = 1.4,1 mg/ml IgG)。包装规格未明确列出,通常根据订单提供不同体积(如1 mg、5 mg、10 mg等),请以实际产品标签为准。
四、生产与纯化工艺
纯化方法
本产品通过分级分离(fractionation) 结合DEAE(二乙氨乙基)离子交换层析从正常兔血清中分离获得。该工艺可有效去除血清中的白蛋白、其他球蛋白(IgA、IgM)及非蛋白组分,获得高纯度的总IgG。
浓度测定
采用比尔定律(Beer’s Law)测定蛋白质浓度,设定1 mg/ml IgG在280 nm波长处的吸光度为1.4。根据实际测得的A280值计算浓度:
浓度(mg/ml)= A280 / 1.4
五、质量控制:免疫电泳验证
为确认产品纯度和免疫学特性,生产商对纯化产物进行了免疫电泳分析,结果表明:
1. 与抗兔IgG特异性血清反应:证实该产物为兔IgG。
2. 不与抗兔IgA或抗兔IgM血清反应:排除了IgA和IgM的污染,表明纯度良好。
3. 与抗兔全血清反应产生单一沉淀弧:该沉淀弧与抗IgG血清产生的沉淀弧一致,进一步确认产物仅为IgG,无其他血清蛋白残留。
六、储存与稳定性
保存条件:2–8°C,严禁冷冻。反复冻融会导致蛋白变性、聚集或活性丧失。
有效期:自收货之日起2年,在未受污染且正确储存条件下。
防腐剂:0.09%叠氮化钠可抑制微生物生长。注意:叠氮化钠对HRP有抑制作用,如用于HRP检测系统,请确保充分洗涤;如需去除叠氮化钠,可使用脱盐柱或透析。
七、ELISA阳性对照
1. 用PBS将本产品稀释至1–10 µg/ml,100 µl/孔包被ELISA板,4°C过夜。
2. 洗涤、封闭后,加入稀释后的抗兔IgG-HRP二抗(如1:5000)。
3. 孵育后洗涤,加底物显色。应出现明显阳性信号。
八、同型对照(流式细胞术)
1. 将本产品与实验一抗稀释至相同浓度(如2 µg/ml)。
2. 分别取等体积对照抗体和实验抗体,加入至不同样本管中,4°C孵育30分钟。
3. 洗涤后加入荧光标记的抗兔IgG二抗,检测信号。同型对照管应给出背景荧光水平。
九、相关产品推荐
抗兔IgG(全分子)HRP偶联物(用于WB/ELISA检测)
抗兔IgG轻链特异性HRP偶联物(用于IP-WB,避免重链干扰)
正常山羊/小鼠IgG(用于不同物种的同型对照)
本产品为经过严格质控的纯化正常兔IgG,浓度高、纯度高、稳定性好,是免疫学实验中可靠的对照试剂。