基础参数栏：
中文名称：AF488 羧基；Alexa Fluor488 羧基
英文名称：AF488-COOH；AF488 acid；Alexa Fluor488-COOH；Alexa Fluor488 acid
CAS：924660-14-0
分子式：C12H14O11S2
分子量：648.49
Ex(nm)：499
Em(nm)：520
产品纯度：95%+
外观性状：橙红色结晶性粉末
储存条件：-20℃干燥避光密封储存，严格隔绝强亲核试剂、强酸碱与强氧化物质，避免反复冻融，长期充入高纯氩气可稳定放置18个月以上
用途：通过末端羧基的活化反应，与含氨基的生物分子、聚合物、材料表面发生酰胺化偶联，将AF488高亮度绿色荧光基团定点引入靶标体系，用于各类生物样本的荧光标记与成像检测
产品介绍
AF488-COOH是面向高稳定性绿色荧光标记场景开发的磺化罗丹明类羧基功能化荧光染料。该产品以AF488荧光母核为基础，在分子结构中引入两个磺酸基团提升水溶性，同时在侧链修饰游离羧基作为偶联位点，完整保留了AF488染料高亮度、抗光漂白性能优异的核心特性，彻底解决了传统FITC类荧光染料易水解、pH敏感的缺陷，是当前生物成像领域应用广泛的绿色荧光标记基础试剂。
作用机理
该试剂的定点标记依托羧基的可控活化与荧光母核的特异性光物理特性实现。首先在弱碱性无水体系中，通过EDC、NHS等常规缩合剂将末端羧基活化为活性酯中间体，随后调整体系至pH7.2-8.0的生理缓冲液条件，即可与底物分子上的伯氨基发生高效酰胺化反应，将AF488荧光基团定点连接到底物上。标记完成后的AF488分子，在495nm激发光照射下可被高效激发，在519nm处发射出明亮的绿色荧光，整个光物理过程不受常规生理环境中pH值波动的显著影响。
性能参数与核心优势
该产品纯度稳定在95%以上，不含荧光母核分解杂质与磺酸基脱落副产物，批次间的羧基偶联活性与荧光量子产率高度均一，相同实验条件下的氨基底物标记效率可达92%以上。两个磺酸基团赋予产品优异的水相溶解性，在纯PBS缓冲液中即可完全溶解，无需添加高比例的有机助溶剂，完全避免了有机试剂导致的生物分子变性风险。该染料的荧光量子产率可达0.9以上，抗光漂白性能是传统FITC染料的3倍以上，在长时间共聚焦激光扫描成像过程中，荧光信号衰减速度极慢，可支持长时间动态成像观测。同时该染料的荧光信号在pH4-10的宽范围内保持稳定，不会因生物样本内的局部pH变化出现荧光淬灭问题。
应用领域
该试剂可用于抗体分子的绿色荧光标记。将该试剂通过EDC/NHS活化后，与IgG抗体表面的赖氨酸侧链氨基进行定点偶联，制备得到AF488标记的荧光二抗，用于免疫荧光染色实验，成像信噪比远高于传统FITC标记二抗，可清晰分辨细胞内的亚细胞结构细节。该试剂可用于多肽分子的荧光示踪标记。将该试剂与固相合成切割后的游离多肽侧链氨基进行偶联，制备得到位点确定的AF488标记多肽，用于活细胞内多肽的摄取与转运动态示踪实验，长时间观测过程中荧光信号稳定，不会出现快速淬灭导致的信号丢失问题。该试剂可用于微流控芯片的荧光功能化修饰。将该试剂活化后与氨基修饰的微流控芯片通道表面进行偶联，制备得到带绿色荧光标记的功能化芯片，用于芯片表面的分子固定效率与流体运动轨迹的可视化表征，长时间激光照射下荧光信号无明显衰减，可支持多轮重复成像检测。
（上述信息均由陕西新研博美生物科技小编木木所整理）
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