井冈霉素模块(活性端):井冈霉素是由吸水链霉菌井冈变种产生的一种氨基糖苷类农用抗生素。在农业上,它通过强烈抑制病原菌体内的海藻糖酶,阻断真菌对葡萄糖的利用,导致菌丝伸长及侵染菌块形成受阻;同时,它还能诱导作物(如水稻、小麦)产生系统性抗病性(相当于给植物打“疫苗”),并强烈抑制赤霉病菌毒素的合成。
生物素模块(捕获端):生物素作为经典的亲和标签,能够与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)发生极强的特异性非共价结合,为复杂生物体系中的靶标富集与高灵敏度检测提供了基础。
一、合成方法
葡萄糖 6 位伯羟基定点衍生路线【Pull-down 首选方案】
合成路线:
1.正交保护策略:选择性封闭所有环醇仲羟基,仅保留葡萄糖残基 6 位伯羟基;
2.6 位伯羟基活化,与两端氨基 Linker 发生醚键 / 氨基甲酸酯连接;
3.Linker 末端游离伯氨基与 Biotin-LC-NHS / Biotin-PEG4-NHS 温和酰胺偶联;
4.温和条件脱保护,释放全部关键游离羟基;
5.组合正相 + 反相制备 HPLC 纯化,除去游离生物素、多取代杂质,冻干得到纯品探针。
优势:最大程度保留完整井冈霉素骨架、仲胺桥、全部环羟基、β- 葡萄糖苷;不破坏真菌识别与海藻糖酶结合结构;酰胺键生理缓冲液稳定,不易水解。 Linker 推荐:真菌蛋白组筛选优先选用PEG4 柔性接头,降低大量羟基带来的非特异性氢键吸附。
二、理化性质
1.外观:白色类白色冻干粉末
2.溶解性:水溶性极好,易溶于水、甲醇、DMSO;几乎不溶于低极性有机溶剂;水溶液易吸潮。
3.稳定性:中性水溶液稳定;强酸强碱条件糖苷键易断裂;避免长时间高温。
三、应用场景
靶标蛋白垂钓(Pull-down)与互作网络解析
植物免疫与系统性抗病机制研究
新型靶向农药研发与毒素调控研究
药物代谢与残留分析
生物素-烟酰胺
生物素-3β-羟基-5-胆稀酸
生物素-全氟辛酸
生物素-γ-氨基丁酸,Biotin-GABA
Biotin-Gambogenic acid
生物素-甘油磷酸钠盐
Biotin-Putrescine
生物素-昆布多糖
Biotin-ALCAR
Biotin-Hydrazide
Biotin-Abacavir
Biotin-CD环糊精
生物素-人参皂苷Rg1
Biotin-vitamin B1
生物素-苯乙酰谷氨酰胺
Biotin-Amphotericin B
生物素-异牡荆素
生物素-薯蓣皂苷
生物素-烟酰胺
生物素-谷胱甘肽
生物素-3,4-二羟基苯丙酸
生物素-α-苯乙胺
生物素-水解蚕丝蛋白
生物素-脱落酸
生物素-左旋肉碱