一．简介：
急性脊髓损伤（Acute Spinal Cord Injury, ASCI）是一种严重的神经系统创伤，常导致损伤平面以下感觉、运动及自主神经功能的永久性丧失，给患者家庭和社会带来沉重负担。深入探究其病理生理机制、筛选有效的神经保护与修复策略，是神经科学领域的热点与难点。建立稳定、可靠且可重复的动物模型是开展上述研究的前提与基础。啮齿类大鼠因具有易于获得、环境适应性强、手术操作简单、术后易于护理等优势，成为制备脊髓损伤模型的首选实验动物。目前，常用的造模方法包括脊髓挫伤（如经典的Allen's打击法）、压迫损伤、横断损伤及缺血再灌注损伤等，研究者可根据不同的实验目的选择合适的模型方案。
- 材料：
1.货号：DSI545Ra01
2.实验动物：SPF级SD大鼠，雄性，周龄为6w~8w，体重为220g~250。
三．模型制作方法步骤：
1.取正常大鼠用腹腔麻醉，将大鼠俯卧，固定于大鼠固定板上，在背部脊髓两侧触摸大鼠最下肋与软组织分界处(浮肋与第 13胸椎连接处)作为骨性定位标志，向上、下 5 cm 范围备皮、脱毛后常规消毒，铺无菌手术单，在后正中线做纵行切口，大约 3cm ，依次切开皮肤、皮下筋膜，暴露椎旁肌，约平对第 10 胸椎棘突，钝性剥离肌肉暴露棘突、椎板和横突。参考定位：T9棘突倾向尾侧，T10 棘突中立位，T11 棘突倾向头侧。
- 确定 T10胸椎位置，用骨剪在 T9 与 T10、T10与T11 棘突及相应椎板之间分别做两个横行剪口，再在 T10 胸椎两侧，横突与椎板连接处做纵行剪口，形成一个方形剪口界线，然后用咬骨钳咬住 T10 胸椎棘突用力拉起即“揭盖”，去除 T10 椎板，形成方形骨窗，修整骨窗边缘，充分暴露 T10对应的脊髓。
3. 用Allen' s 撞击器制备脊髓损伤动物模型，打击时，用拉钩拉开脊髓两侧软组织，牵拉固定，使脊柱稳定，不受呼吸运动影响，使10 g 重量的击打棍从6cm 高度自由落体，致伤能量 60 g·cm，撞击T10 骨窗对应的脊髓，造成急性脊髓损伤，击打脊髓后，击打棍不动，停留 3 min 再移开。
4. 撞击成功标准为：撞击脊髓组织水肿、出血，硬脊膜完整呈紫红色，紧张，膨隆，大鼠尾巴出现痉挛性摆动，双下肢躯体回缩样扑动，呈迟缓性瘫痪。常规分层缝合后回笼饲养。
5. 术后3天，每只大鼠每天注射40万单位青霉素，防止感染。
6.术后7天，每天要人工辅助大鼠排尿，每天换窝，并注意移动大鼠的位置，保持笼具的干燥。
注意事项
1. 手术过程中尽可能减少动物的创伤
2. 暴露脊髓的时候，尽可能不要损伤到脊髓
3.术后3天，每只大鼠每天注射40万单位青霉素，防止感染
4.术后7天，每天要人工辅助大鼠排尿，每天换窝，并注意移动大鼠的位置。
图一：手术建模实操图
图二：大鼠坐骨神经注射荧光金
四．模型评估：
ASCI大鼠模型的评价，主要包含以下几个方面：
- 行为学评估（金标准）：这是评估运动功能恢复最核心的指标。
BBB评分：这是国际通用的21分制开放场地运动评分量表。0分代表后肢完全瘫痪，21分为正常运动功能。通过观察大鼠后肢关节活动、步态、协调性及身体支撑能力进行打分。
斜板试验：将大鼠放在可升降的粗糙斜板上，记录其能停留5秒的最大角度，以此评估其躯干力量和平衡能力。
- 组织病理学评估：通过组织染色，在显微镜下直接观察脊髓的损伤情况。HE染色：用于观察脊髓组织的空化（囊腔）、轴突损失、神经胶质增生及炎性细胞浸润等病理改变。特殊染色：如尼氏染色用于观察神经元尼氏体的变化，评估神经元损伤程度。
- 分子与细胞生物学评估（机制探索）：用于在分子层面探究损伤与修复的机制。细胞凋亡检测：通过TUNEL染色检测凋亡细胞，或通过Western Blot、PCR等技术检测凋亡相关蛋白（如Bax、Bcl-2、Caspase-3）的表达。炎症因子检测：通过ELISA等方法检测脊髓组织中IL-1β、IL-6、TNF-α等促炎因子，以及IL-10等抗炎因子的水平。
4.神经示踪技术：如BDA示踪或荧光金逆行追踪，用于标记和观察皮质脊髓束等神经通路的完整性与再生情况。
图三：大鼠坐骨神经荧光金逆行追踪荧光图
图四：脊髓组织HE染色图 （上：对照组；下：模型组）
图五：脊髓组织GFAP荧光染色图 （上：对照组；下：模型组）
五．广泛的应用场景
脊髓损伤（ASCI）大鼠模型的应用场景广泛，是连接基础研究与临床转化的关键桥梁。
药物与治疗策略筛选：这是该模型最核心的应用。它被广泛用于评估各类神经保护剂（如抗氧化剂、抗凋亡药物）、抗炎药物、神经营养因子以及传统中药复方的疗效，为脊髓损伤的药物治疗提供可靠的体内数据支持。
干细胞与再生医学研究：模型为评估间充质干细胞、神经干细胞及诱导多能干细胞等在脊髓损伤中的移植治疗效果、安全性和迁移分化能力提供了关键平台。
病理机制探索：用于深入研究脊髓损伤后的继发性损伤级联反应，包括炎症反应、氧化应激、细胞凋亡、自噬以及胶质瘢痕形成等复杂分子机制。
组织工程与生物材料评估：该模型被用于测试各种新型生物支架材料（如导电水凝胶、3D打印支架）的神经修复效果，评估其与宿主组织的整合能力及促进轴突再生的潜力。
康复与神经调控研究：结合电生理监测，模型可用于评价康复训练、电刺激及神经调控技术对脊髓损伤后功能恢复的促进作用。
六．结语
云克隆拥有完备的动物实验资质，严格遵循标准化操作规程，确保模型数据稳定可靠，并与国内外知名药企及科研机构建立了深度合作。其脊髓损伤（ASCI）大鼠模型因高度模拟人类病理过程、评价体系成熟且造模方式灵活，已成为该领域的基础研究平台。该模型不仅深化了对损伤机制的理解，更为新药与疗法的临床转化提供了关键依据。随着基因编辑、干细胞及组织工程等前沿技术的突破，ASCI模型将持续发挥重要桥梁作用，助力攻克这一医学难题。
