news 2026/8/28 18:18:39

做骨分化的经典小鼠前成骨细胞 MC3T3-E1,怎么养出好状态

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张小明

前端开发工程师

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做骨分化的经典小鼠前成骨细胞 MC3T3-E1,怎么养出好状态

搞骨组织工程、骨质疏松或者成骨分化的同学,MC3T3-E1 基本是绕不开的一株。它是小鼠颅顶来源的前成骨细胞,最大的价值是能在体外分化成骨、形成钙化组织,是研究骨形成的标准模型。

MC3T3-E1 是小鼠颅顶前骨细胞,从 C57BL/6 小鼠颅骨建立,基于高碱性磷酸酶(ALP)活性筛选而来。它能分化成成骨细胞和骨细胞,体外可形成钙化骨组织(矿物沉积鉴定为羟基磷灰石),分泌胶原,表达白血病抑制因子(mLIF)。主要用于成骨分化、骨代谢研究。

细胞背景与来源

来源:小鼠(C57BL/6),颅顶骨。贴壁生长,成纤维样/上皮样,低密度时形态较伸展,长满后呈铺路石样。

应用场景与研究价值

  • 骨生物学:成骨细胞分化、矿化(羟基磷灰石沉积)研究。
  • 骨代谢/疾病:骨质疏松、骨再生、生长因子(TGF-β、bFGF、PGF2α)调控研究。

培养特性与注意事项

培养基:EMEM(MEM + NEAA)+ 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁、长得快,要保证培养基量充足,长到 80% 及时传代,一般 1:2-1:3,周期 2-3 天。

传代:PBS 润洗后胰酶消化,消化到部分细胞脱落再终止;900 rpm 离心 3-5 min,重悬后细胞应分散成单个。换液 2-3 天一次。

冻存:程序性冻存液,程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏:37℃ 水浴至米粒冰块,150g 离心 1-2 min。生物安全:BSL-1。

注意:消化不到位会影响后续生长,宁可多观察几次也别硬扯;做分化实验时注意细胞代数,代数太老分化能力会下降。

MC3T3-E1 消化这步最容易翻车,体系统一会省心很多。尚恩生物(SUNNCELL)有 MC3T3-E1 现货(货号 SNL-518),配套专用培养基,细胞过 STR 鉴定,技术支持也能帮你看消化状态。

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