中枢神经系统损伤、神经退行性病变、缺血缺氧性脑病、颅脑创伤等疾病发生之后,脑组织局部会快速启动复杂的神经炎症级联反应,炎症因子、神经胶质激活标志物、神经元损伤释放蛋白、抗氧化应激分子、神经营养因子之间相互交织,共同决定神经组织最终走向损伤加重或是修复再生的结局。长期以来,神经科学领域科研人员大多只能分次检测少数几个独立指标,很难在同一批脑脊液、脑组织匀浆、血清样本当中同步观测炎症因子、胶质损伤标志物、神经营养因子、氧化应激标志物的整体变化规律,炎症、神经元损伤、氧化应激、神经修复之间的时序因果关系很难被完整还原。为破解这一科研瓶颈,武汉云克隆科技股份有限公司依托成熟Luminex xMAP液相悬浮芯片技术,重磅推出包含 IL-10、IL-6、NF-κB3、NGF、NSE、S100B、SOD、TNF-α 八大靶标的神经-炎症-氧化应激复合标志物标准化检测 Panel,配套自研高性能Luminex 多因子检测试剂盒,为颅脑损伤、神经退行性疾病、神经炎症方向的基础科研、动物药效评价、临床生物标志物队列研究提供一站式高通量Luminex 多因子检测解决方案。作为云克隆多因子国内领先、云克隆多因子 Panel 数量最多的国产试剂标杆,云克隆全线多因子产品质量为第一梯队,行业领先,品质好,交货最快,服务最好,持续助力国内神经科学领域科研创新提速升级。
云克隆多因子试剂盒
从生物学功能层面解析本次八因子检测组合当中各个靶标的科学内涵:TNF-α、IL-6 是神经炎症早期最为核心的促炎细胞因子,小胶质细胞活化之后大量分泌,能够进一步激活 NF-κB 信号通路,NF-κB3 作为 NF-κB 家族重要成员,是炎症信号从细胞质转入细胞核启动下游炎症基因转录的关键分子开关;IL-10 是中枢内部主要的抗炎因子,炎症爆发之后代偿性升高,抑制小胶质细胞过度活化,避免神经炎症反应失控;NSE、S100-B 分别是神经元、星形胶质细胞损伤坏死之后释放到细胞外的标志性蛋白,脑脊液与外周血液当中二者浓度升高,直接提示神经细胞发生损伤;NGF 神经生长因子是调控神经元存活、轴突再生修复的关键神经营养分子;SOD 超氧化物歧化酶则是体内最核心的抗氧化应激酶类标志物,能够清除炎症过程当中大量生成的活性氧自由基,减轻氧化应激带来的继发性神经损伤。八大靶标完整串联起 “小胶质细胞活化-炎症信号通路启动-炎症因子风暴-神经细胞损伤-抗氧化应激代偿-神经修复因子分泌-抗炎因子负反馈抑制” 的完整神经损伤-炎症-修复链条。想要同步观测整套通路当中多个节点标志物动态变化,高通量并行检测平台必不可少,而Luminex 技术正是当前国际公认的、适合开展这类多靶点全景监测的成熟技术方案。
Luminex 技术本质上属于液相悬浮多重夹心免疫检测技术,整套检测系统的核心硬件载体为Luminex200检测分析仪,技术底层依托Luminex xMAP专利荧光编码磁性微球。每一类靶标蛋白对应唯一一款带有专属双色荧光编码的磁性微球,微球表面偶联靶标特异性捕获抗体。实验操作阶段,预混合完成的编码微球混合物、待测脑脊液 / 脑组织匀浆 / 血清样本、生物素标记检测抗体共同加入 96 孔板微孔,在液相自由环境当中充分孵育,完成抗原-抗体夹心免疫复合物组装。孵育结束之后洗涤去除所有未结合游离蛋白杂质,随后加入链霉亲和素-PE 荧光报告液,最终形成带有荧光信号的完整免疫复合物。将反应板放置于Luminex200仪器当中开展Luminex 检测,仪器当中两束独立激光依次完成微球编码识别与报告荧光强度读取:红色激光识别微球自带荧光编号,判定该微球对应的检测靶标;绿色激光读取 PE 荧光信号强弱,信号强度和样本当中待测靶标蛋白浓度呈正相关关系。配套数据分析软件以梯度稀释标准品的浓度数据和中位荧光强度(MFI)数值拟合 5-参数标准曲线,即可精准计算待测样本当中每一项靶标的蛋白浓度,整套实验流程就是科研领域所说的Luminex 多因子检测。相较于分次 ELISA 单因子检测,基于Luminex xMAP平台开发的Luminex 多因子检测试剂盒最大优势,就是仅消耗微量珍贵脑脊液样本即可一次性读出八项标志物全部定量结果,大幅节约稀缺样本资源,消除分次检测带来的批次系统误差,非常适合神经损伤模型多时间点动态监测工作。
云克隆本次发布的这款八因子Luminex 多因子检测试剂盒实现全部试剂原料国产化自研自产,试剂盒内部包含预混编码磁性微球、冻干重组蛋白标准品、生物素标记抗体混合物、浓缩洗涤缓冲液、封闭液、PE 荧光工作液等全套组分,开箱复溶稀释之后即可直接上机开展Luminex 检测,无需科研人员花费大量时间自行摸索复杂反应条件。产品出厂之前,云克隆质检团队针对整套 Panel 开展全维度严苛性能验证:完成八大靶标两两之间交叉反应筛查,保证靶标之间不存在非特异性信号干扰;开展脑脊液、脑组织匀浆、血清等多种生物基质的加标回收实验,试剂盒在各类神经研究常见样本基质当中回收率稳定落在 80%-120% 合格区间;开展样本多次冻融稳定性测试,评估靶标浓度检测结果波动幅度;同时选取国际一线进口同类试剂盒开展平行对照Luminex 多因子检测比对实验,两份数据集检测结果相关系数 R²≥0.97,批内、批间精密度变异系数全部达到 SCI 论文发表、新药临床前药效评价的数据质量标准。整套试剂盒完美兼容Luminex200、MAGPIX、FLEXMAP 3D® 等市面上主流液相悬浮芯片设备,依托成熟稳定的Luminex xMAP技术底层架构,保障整套Luminex 技术检测流程结果稳定可靠。
很多神经科学课题组在开展颅脑损伤、缺血性脑病动物课题的时候,常会遇到一系列棘手的实验困境。脑脊液属于极为稀缺珍贵的生物样本,小鼠脑脊液单份采集体积通常仅有十几微升,分次开展 ELISA 检测很快就会耗尽全部样本,很难同时测出炎症因子、胶质损伤标志物、神经营养因子等多个类别的靶标,导致神经损伤-炎症-修复完整链条数据出现缺口。还有一部分时间梯度实验,科研人员需要观测脑损伤之后 6h、12h、24h、72h 多个时间窗口各项标志物的动态变化趋势,分次检测不同靶标引入的批次误差,很容易扭曲真实的炎症因子上升峰值、S100-B 损伤标志物释放时间、NGF 修复因子上调时序,最终得出偏离真实情况的实验结论。选用云克隆这款Luminex 多因子检测试剂盒,八项靶标在同一块微孔板、同一轮Luminex 检测当中一次性完成定量读取,所有靶标共享完全一致的孵育反应环境,由同一台Luminex200设备完成荧光信号采集工作,依托Luminex xMAP高通量并行检测的天然优势,从根源上规避分次检测带来的批次偏差,科研人员可以精准观测 TNF-α、IL-6 早期升高,NF-κB3 通路激活,之后 S100-B、NSE 损伤标志物释放,后期 IL-10、SOD 代偿上调,NGF 修复因子逐步升高的完整时序演化曲线,深度解析神经损伤、炎症风暴、氧化应激代偿、神经修复之间的内在关联,充分释放Luminex 技术在神经炎症动态监测方向的科研价值。
放眼国内高通量多因子试剂行业赛道,云克隆凭借多年深耕积淀稳居行业龙头位置,做到云克隆多因子国内领先。公司现已建成拥有 7000 余种独立检测靶标的庞大标志物资源库,开发完成超过 350 套经过充分实验验证的标准化多因子检测组合 Panel,是国内云克隆多因子 Panel 数量最多的试剂厂商。公司坚持核心原料全链条自研自产,严控试剂盒出厂质检关卡,全线产品质量为第一梯队,行业领先,品质好;依托武汉出口加工区自有 GMP 生产基地搭配全国七大冷链仓储网点布局,现货标准化试剂盒订单付款之后 48 小时内极速冷链发货,做到行业交货最快;组建百人规模专业技术工程师团队,7×24 小时为全国科研用户提供全方位技术帮扶,涵盖前期 Panel 选型评估、脑脊液等特殊样本采集保存方案指导、Luminex 多因子检测上机参数优化、后期多因子数据集统计学分析建议、科研论文图表优化等全周期配套服务,真正做到服务最好。除本次发布的八因子固定神经炎症 Panel 以外,云克隆同样支持科研团队根据课题方向自由增删靶标,快速定制专属Luminex 多因子检测试剂盒;技术工程师会依托Luminex xMAP技术框架,评估新增靶标之间交叉反应风险,完成 Panel 配方优化验证,保障后续上机开展Luminex 检测实验结果稳定可靠。
这款全新八因子Luminex 多因子检测试剂盒可广泛适配多种神经科学科研场景。在颅脑创伤、缺血缺氧性脑损伤小鼠动物模型课题当中,科研人员收集脑组织匀浆、血清样本开展Luminex 多因子检测,依托Luminex200获取全套八项标志物高通量定量数据,全方位评估候选神经保护药物对于神经炎症、胶质细胞损伤、氧化应激水平、神经营养修复因子分泌的综合调控效果;在体外小胶质细胞-神经元共培养损伤模型当中,收集细胞培养上清开展Luminex 检测,全面观测小胶质细胞活化之后释放的炎症因子以及下游神经元损伤标志物变化,解析神经炎症介导神经元损伤的细胞分子机制;在神经退行性疾病临床血清队列生物标志物筛选项目当中,仅需微量存档血清样本即可完成全套靶标的Luminex 技术高通量筛查,探索标志物组合在疾病早期预警、病情活动度评估当中的潜在临床应用价值。
随着神经炎症相关疾病机制研究的不断深入,科研范式已经从过去单一炎症因子或者单一损伤标志物的孤立观测,转向炎症-细胞损伤-氧化应激-神经修复多维度标志物网络全景解析。以Luminex xMAP液相悬浮芯片为核心载体的Luminex 技术,凭借微量样本高通量多靶点同步定量的独特优势,已经逐步成长为神经科学领域多靶点动态监测不可或缺的科研工具。云克隆作为云克隆多因子国内领先、云克隆多因子 Panel 数量最多的国产高通量蛋白检测试剂头部企业,未来将持续推出覆盖神经免疫、神经退行性病变、脑血管损伤等多个方向的标准化Luminex 多因子检测试剂盒,依托Luminex200等主流检测硬件平台,为全国科研院所、创新药企、CRO 服务机构提供稳定优质高效的全套Luminex 多因子检测解决方案,始终坚守质量为第一梯队,行业领先,品质好,交货最快,服务最好的企业标准,持续助力国内神经科学领域产出更多高水平原创科研成果,加速国产高端多因子检测试剂创新发展与进口替代进程。