GW9662是一种选择性PPARγ（过氧化物酶体增殖物激活受体γ）拮抗剂，其作用机制是通过共价修饰PPARγ配体结合域中的Cys285位点，阻断其与配体的结合[1]。GW9662在细胞实验中，常被用于验证PPARγ在信号通路中的作用或与某一种细胞生命活动的相关性。例如，GW9662（CAS No.：22978-25-2）在HepG2细胞中，证实了PPARγ可调节细胞脂肪酸储存和葡萄糖代谢[2]。此外，在RAW264.7巨噬细胞中，GW9662通过调控PPARγ影响SREBP1c、FAS等基因的表达，影响了脂质摄取与氧化的平衡。
GW9662在葡萄糖-氧-血清剥夺（GOSD）的小胶质细胞模型中，通过抑制PPARγ加剧了缺血性炎症反应和细胞死亡，提示PPARγ在细胞应激反应中具有重要作用[3]。在动物模型中，GW9662同样被用于探究PPARγ的生理功能，例如GW9662（1 mg/kg）在高脂饮食（HFD）诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）小鼠模型中，通过抑制PPARγ/CD36通路改善了脂质代谢，并调节了肠道菌群组成（如减少有害菌Lachnospiraceae_NK4A136_group和Helicobacteraceae）[4]。 GW9662在大鼠腹膜纤维化模型中，通过抑制PPARγ/GLUT1轴加剧纤维化进程；而PPARγ激动剂Rosiglitazone（BRL 49653, 罗格列酮,CAS: 122320-73-4）则表现出相反的生物学效应。类似地，在Doxorubicin（阿霉素）诱导的小鼠心脏损伤模型中，GW9662通过拮抗PPARγ加剧了心脏炎症和凋亡；而PPARγ激动剂Pioglitazone（吡格列酮，U 72107，CAS: 111025-46-8）则具有保护作用[5]。
范例详解
Acta Pharmacol Sin. 2020 Mar;41(3):373-382
中国药科大学的科研团队在上述文章中使用了AbMole的GW9662（AbMole，M2748），实验人员探究了积雪草酸（Asiatic-acid，AA，CAS: 464-92-6）对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾纤维化的预防作用及其机制。研究发现，UUO的大鼠模型表现出明显的肾功能障碍、间质纤维化、氧化应激以及TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin信号通路的激活。而积雪草酸预处理能够显著改善这些病理变化。进一步研究表明，积雪草酸并非直接改变肾脏中PPAR-γ的表达水平，而是通过显著增加PPAR-γ的内源性配体15d-PGJ2的血浆水平来发挥作用。GW9662作为一种选择性PPAR-γ拮抗剂，在本研究中被用于验证积雪草酸的作用机制。研究发现，与GW9662共同处理（1 mg·kg⁻¹ per day, ip）7天，能够完全消除积雪草酸的保护作用。这表明积雪草酸的抗纤维化作用是通过激活PPAR-γ信号通路实现的。
GW9662 abolished the protective effects of AA in UUO rats[6]
参考文献及鸣谢
[1] Brust, R.; Lin, H.; Fuhrmann, J.; et al. Modification of the Orthosteric PPARgamma Covalent Antagonist Scaffold Yields an Improved Dual-Site Allosteric Inhibitor. ACS chemical biology2017, 12 (4), 969-978.
[2] Cheng, V.; Reddam, A.; Bhatia, A.; et al. Utilizing systems biology to reveal cellular responses to peroxisome proliferator-activated receptor gamma ligand exposure. Current research in toxicology2021, 2, 169-178.
[3] Lin, C. H.; Liao, L. Y.; Yang, T. Y.; et al. Microglia-Derived Adiposomes are Potential Targets for the Treatment of Ischemic Stroke. Cellular and molecular neurobiology2019, 39 (5), 591-604.
[4] Xiao, J.; Xiang, H.; Xiang, H.; et al. GW9662 ameliorates nonalcoholic steatohepatitis by inhibiting the PPARgamma/CD36 pathway and altering the gut microbiota. European journal of pharmacology2023, 960, 176113.
[5] Pakravan, G.; Peymani, M.; Abedpoor, N.; et al. Antiapoptotic and anti-inflammatory effects of Ppargamma agonist, pioglitazone, reversed Dox-induced cardiotoxicity through mediating of miR-130a downregulation in C57BL/6 mice. Journal of biochemical and molecular toxicology2022, 36 (6), e23041.
[6] Zhang, Z. H.; He, J. Q.; Zhao, Y. Y.; et al. Asiatic acid prevents renal fibrosis in UUO rats via promoting the production of 15d-PGJ2, an endogenous ligand of PPAR-γ. Acta pharmacologica Sinica2020, 41 (3), 373-382.
